口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪实验装置说明书

仪器简介

口罩细菌过滤效率（BFE）检测仪根据《医用外科口罩技术要求》YY0469-2011中附录B细菌过滤效率(BFE)试验方法第B.1.1.1试验仪器的要求，结合美国试验材料学会ASTMF2100、ASTMF2101、欧洲EN14683等标准规定，测定口罩材料对细菌悬浮粒子滤除的百分数。仪器采用双气路同时对比采样方法，提高了采样的准确性，适用于计量检定部门、科研院所、口罩生产企业以及其它相关部门对口罩细菌过滤效率的性能测试。

测试标准

YY0469-2011附录B细菌过滤效率(BFE)试验方法第B.1.1.1试验仪器

YY/T 0969-2013一次性使用医用口罩

ASTM F2101用金黄色葡萄球菌的生物气溶胶评定医用面罩材料细菌过滤效果(BFE)的标准试验方法

ASTM F2100医用口罩材料性能的标准规范

EN 14683医用口罩-要求和测试方法

相关术语

细菌过滤效率BFE-在规定流量下，口罩材料对含菌悬浮粒子滤除的百分数

医用外科口罩-用于遮盖使用者的口鼻及下颌，为防止病原体微生物、体液、颗粒物等的直接透过提供物理屏障

测试原理

在口罩上游发生一定浓度的细菌气溶胶，进入气雾室混合均匀后，细菌气溶胶进入两路平行的气路采样系统，其中一路在采样器上端加检测样品，另外一端不加样品，作为阳性质控，通过计数阳性质控的值和样品测试的值，之间的比值作为泄漏率，从而得出过滤效率。

操作

1.1细菌悬浮液制备

1.1.1仪器

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪、高压蒸汽灭菌器、电子天平、生化培养箱、超净工作台、菌落计数仪。

1.1.2试剂及材料

蒸馏水、75%消毒酒精、胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）、胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)、蛋白胨、酒精灯、90mm培养皿、500mL锥形瓶。

细菌悬浮液制备

培养基配置

取500mL锥形瓶，按照要求精确称取一定量的TSA培养基，加入合适比例的蒸馏水，包扎后放入高压蒸汽灭菌器，121°C灭菌15min，灭菌结束后取出，待其冷却至约50°C时，将培养基逐个倒入无菌培养皿中，操作应在超净工作台中进行，以酒精灯的火焰周围作为无菌区域，避免杂菌污染，每个培养皿中应倒入约27mL培养基。

无菌确认

待培养基冷却凝固后，将其倒置放入恒温培养箱中，37°C条件下培养24h，将有菌落生长的培养皿舍弃不用，无杂菌生长的取出备用。

细菌悬浮液制备

挑取一环金黄色葡萄球菌ATCC6538接种在适量胰蛋白胨大豆肉汤培养基中，在（37±2）°C振荡培养（24±2）h，然后用1.5%的蛋白胨将上述培养物稀释至约5×105cfu/ml。

管路确认

试验开始前首先检查一下系统管路是否连接正确，确保管路没有漏气、堵气的地方，正确的管路连接如图所示：

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

消毒

在试管中加入适量70%酒精，接入系统管路中，进入“系统消毒”模式，设定蠕动泵流量、喷雾流量及时间后，开始消毒。

用镊子夹取酒精棉球擦拭安德森采样器每一级的上下表面，擦拭完后，在酒精灯火焰上方将剩余酒精燃尽，并观察采样器微孔是否有堵塞，如有堵塞，可用针将其通开。

试验材料/工具准备

将装有浓度为5×105cfu/ml的金黄色葡萄球菌悬液的试管和空白废液回收试管分别插入到试管架上，将蠕动泵夹具开关锁紧，蠕动泵吸管伸入金黄色葡萄球菌悬液液面中，废液回收软管插入空白试管中。

将试验所需的培养皿、待检测口罩等材料一起放入仪器中，关紧仪器门。试验进行过程中禁止向负压柜内部放器具，否则会使柜内的污染气体泄漏，造成环境的污染。

确认准备工作无误后，关上系统玻璃门开始试验。

采样检测

打开检测仪的电源总开关，打开控制面板上的电源开关按钮，系统自动进入BFE控制系统初始界面，如图所示（系统开机初始界面配图），打开仪器的照明灯和风机，运行5min。

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

点击“过滤试验”按钮，即可进入到试验主界面，如图所示（系统试验主界面配图）：

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

试验操作人员平坐或平站在仪器前方，将双手分别放入手套内部，打开采样头，将制备好的培养皿逐个放入左右两路六级安德森采样器中，阳性对照组不加口罩，直接连入系统管路。培养皿的上盖要反扣，以防微生物沉降在上盖的内表面，污染培养基，影响试验结果。

点击“启动蠕动泵”按钮，设置蠕动泵流量（建议3.000ml/min），让菌液提前由试管供到喷雾器喷嘴，目测菌液达到喷嘴最高端后停止蠕动泵。（配启动蠕动泵软件界面图）

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

点击系统设定按钮，弹出系统参数设定框，根据试验需求设定合适的蠕动泵流量（建议0.050ml/min，根据所测阳性质控值进行调节）、喷雾流量（建议10L/min）、采样时间（默认2 min，标准所定）、供液时间（默认1 min，标准所定）以及自动清洗时间（建议1 min），点击确定按钮，保持参数。（配参数设置软件界面图）

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

点击开始试验选项，进入气路平衡，实验人员观察各个气路运转是否正常，气路平衡的目的就是在正式试验前使各项数据进入预设工作参数，流量稳定，气雾室压力稳定在(-90~-120)Pa之间。如果运转正常，显示绿色字体，如有异常情况，显示红色字体。（配气路平衡运行软件界面图）

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

待流量稳定后，按“确认”按钮进入正式试验界面如图所示，此过程完全按照系统设定里面的参数运行，运行参数见界面显示，状态显示在软件界面的右中部。采样完毕后自动进入到采后清洗状态。

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

若用户要想对气雾室进行单独清洗，可在软件初始界面，点击“系统清洗”按钮，进入到系统清洗界面。如图所示，系统清洗有三种选择模式，分别为:消毒液清洗、蒸馏水清洗和空气清洗。用户可以根据自己的需要，选择不同的清洗模式。

口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪

正式试验结束后，逐级取出培养皿并盖上皿盖，标记后倒置放入恒温培养箱中，37°C培养24h～48h。试验中，阳性对照组应进行至少两次试验，最终阳性质控结果取

若用户在试验中途因种种原因不想在继续试验，可按“退出试验”按钮，退出本系统。本次试验完毕后，系统会自动进入到初始空闲状态，以备用户进行下一次试验。

数据处理与分析

培养结束后，将所有培养皿取出，使用菌落计数仪进行计数，并将每一级菌落数对应阳性孔转换表进行转换，转换后的数值求和，即得出总菌落数，阳性质控值范围应在（2200±500）cfu之间。

细菌过滤效率计算公式如下：

BFE=（C-T）/C×100%

式中：

C--阳性质控平均值

T--试验组菌落总和。

阳性孔转换表：

维护与保养

非工作试验时间，请切断所有电源。本检测仪若长时间不用，应定期通电以保证仪器工作正常，通常每月通电一次，每次通电不少于30分钟。可在气雾室压力平衡状态运行30分钟即可；

电源线长期使用后可能会出现接触不良或断路现象，每次使用前检修，确保电源线无破损、裂缝、断路现象；

禁止阳光直接晒到手套，以免加速老化。

检测仪所配高效过滤器属于易耗用品，正常情况下需一年更换一次；

分水滤气器中有水滴时，请将分水滤气器下端旋钮松开放水，放空后，重新拧紧；

请使用软布和中性清洁剂清洁仪器。在清洗之前，确保先断开电源；请勿使用稀释剂、苯等挥发性物质清洁仪器，否则会改变仪器外壳颜色、擦掉机壳上的标识、使触摸屏显示模糊不清等。

仪器不可放置任何化学物质。

不可超量程使用。

做好接地装置。

未经本公司同意一律不准自行拆装否则后果自负。